「今日爆料」PCR标记总是运行失败，是什么原因？目标明确吗？

一、PCR标记总是运行失败，是什么原因？目标明确吗？

可能是标记的质量不好。没有标记，如何判断目标条带是否正确？

建议重新配置电泳缓冲液，重新配制凝胶，找人借用标记物作为阳性对照，重新运行电泳。

PCR反应完成后，应将反应体系冷却至4保存或放置至室温，等待进一步操作。如果需要检测PCR产物，请将PCR管从热盖上取下，静置约2分钟，然后轻轻混匀。

然后将PCR管中的样品与DNA分子量标记混合，快速加入到准备好的琼脂糖凝胶中，进行蛋白凝胶电泳。

PCR完成后，运行凝胶可以分离PCR产物以进行进一步的检测和分析。

二、为什么PCR产物在电泳仪中跑胶时出现拖尾？

1-可能是胶水没有煮熟！煮时要煮三遍并摇匀，否则胶水密度不均匀。

2-电压，电压太高也会造成拖拽

3-可适当提高电泳槽内的缓冲液浓度。

4、如果还是不好，可以换一个稍微宽一点的梳子，效果一般会好很多。

三、PCR运行和铺展的胶量是多少？

1-PCR跑胶量根据实验要求和样品数量确定。2-PCR实验通常需要多个循环，每个循环需要一定量的PCR反应液，包括模板DNA、引物、酶等。根据实验设计和样品量，需要合适的PCR反应液总量被计算。3-此外，还需要考虑实验过程中可能出现的一些错误或者需要重复实验。因此，铺胶时通常要准备较多的PCR反应液，以保证实验的顺利进行。4-值得注意的是，PCR反应液的配制和使用需要遵循一定的实验操作规范，以保证实验结果的准确性和可靠性。5-如果实验样本数量较多或需要进行大规模PCR实验，可能需要更多的PCR反应液，因此需要在实验计划和预算中提前考虑和安排。

四、PCR产物可以保存多长时间进行凝胶电泳？

如果近期要使用的话，调到4度就可以了。如果近期不使用，最好在-20摄氏度下保存。这是因为反复冷冻和解冻会损伤DNA。未纯化的PCR产物在-20保存一周没有题。纯化后，以干粉形式可在-20C保存数月，如果溶解在Tris中则可保存一到两个月。注意不要将其溶解在纯水中。

五、PCR胶的全称是什么？

PCR全称是Post-ConsumerRecycledmaterial，是指回收消费塑料，如PET、PE、PP、HDPE等再生材料，然后将用于制造新产品的塑料原料进行加工包装材料。例如，消费者使用餐盒、洗发水瓶、矿泉水瓶、洗衣机桶等常用物品产生的废旧塑料的回收。琼脂糖凝胶电泳，简称凝胶电泳，使用的材料有琼脂糖、TAE等缓冲液、核酸染料、缓冲液和DNAmarker。